紫杉醇水蛭素支架涂层复合物对LPS诱导的HCASMC炎性活化过程中核转录因子NF-κB p65及其下游炎症因子的调控作用

摘要：目的 探讨支架涂层复合物紫杉醇水蛭素对脂多糖(LPS)诱导人冠状动脉平滑肌细胞(HCASMC)炎性活化过程中核转录因子NF-κB p65及其下游炎症因子表达的影响.方法 选用4~6代的HCASMC,将细胞分为空白对照组(正常HCASMC,未做任何处理)、LPS模型组(LPS干预)、紫杉醇水蛭素高浓度组(1 μmol/L紫杉醇+0.2 mg/ml水蛭素+LPS干预)、紫杉醇水蛭素低浓度组(1 μmol/L紫杉醇+0.0125 mg/ml水蛭素+LPS干预).每组设置3个复孔.ELISA法检测细胞上清肿瘤坏死因子-α (TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)的表达水平,用Q-PCR法对各组细胞NF-κB p65、TNF-α、IL-6和IL-1β mRNA进行检测,用Western Blotting检测NF-κB p65蛋白表达水平.结果与空白对照组比较,LPS模型组NF-κB p65、TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA表达水平明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05);HCASMC经高、低浓度紫杉醇水蛭素复合物预处理,LPS刺激后,上述指标低于LPS模型组,差异有统计学意义(P均<0.05).LPS模型组NF-κB p65蛋白表达水平明显高于空白对照组,而紫杉醇水蛭素预处理组NF-κB p65蛋白表达水平较LPS模型组明显降低,其中高浓度处理组降低更为显著.与空白对照组比较,LPS模型组TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平升高,差异有统计学意义(P均<0.05).与LPS模型组比较,紫杉醇水蛭素低浓度与高浓度组TNF-α、IL-1β和IL-6水平明显降低,差异有统计学意义(P均<0.05).其中高浓度紫杉醇水蛭素干预后IL-1β表达下降较低浓度更为显著,差异有统计学意义(P<0.05).结论 紫杉醇水蛭素支架涂层复合物对LPS诱导的HCASMC炎性活化过程中NF-κB p65的激活具有明显的抑制作用,有效下调核转录因子NF-κB p65的转录活性,显著抑制下游炎症因子TNF-α、IL-6和IL-1β的表达.